小腸結腸炎耶爾森菌生物學特性

　　調查寧夏小腸結腸炎耶爾森菌人群及動物感染現(xiàn)狀,生物型別的分布及毒力基因攜帶情況.下面是小編搜集整理的小腸結腸炎耶爾森菌生物學特性的論文范文，歡迎大家閱讀參考。

　　小腸結腸炎耶爾森菌生物學特性1

　　摘要：目的理解登封市2023年小腸結腸炎耶爾森菌生物學特性及宿主散布特征。辦法用傳統(tǒng)培育辦法別離小腸結腸炎耶爾森菌，并停止生化鑒定、血清分型和毒力基因PCR檢測。后果2023年采集標本共1138份，別離出小腸結腸炎耶爾森菌169株，總檢出率爲14.85%;其中豬標本檢出率高達36.55%(114/394);生物型3型占86.39%(146/169)，均爲O∶3血清型;毒力基因ail+、ystA+、yadA+、virF+占81.06%(137/169)，ail+、ystA+占5.33%(9/169)，ystB+占12.43%(21/169)，ail-、ystA-、ystB-、yadA-、virF-占1.18%(2/169)。結論豬是小腸結腸炎耶爾森菌的劣勢宿主;小腸結腸炎耶爾森菌的血清型以O∶3型爲主。

　　關鍵詞：小腸結腸炎耶爾森菌;毒力基因;生物分型;登封市小腸結腸炎

　　耶爾森菌(Yersiniaenterocolitica)是一種人獸共患性、食源性病原菌，可在冷藏溫度下生長，普遍存在于自然界各種植物宿主[1-2]，包括牲畜、家禽、嚙齒植物、匍匐植物和水生植物等，其中豬、犬、牛等宿主與人群感染有重要關系，其可惹起胃腸道癥狀、呼吸零碎、心血管零碎和骨骼結締組織等部分組織或全身性疾患[3]。20世紀80年代中期，蘭州[4]和沈陽市發(fā)作小腸結腸炎耶爾森菌盛行，感染病例達500例，惹起高度關注。2023年登封市擴展對腹瀉患者、牲畜和家禽等監(jiān)測范圍，尤其是對屠宰場豬咽拭子、肛內容物及食品等監(jiān)測范圍。對別離出的小腸結腸炎耶爾森菌停止生物化學鑒定、血清學分型及PCR擴增毒力基因等，理解小腸結腸炎耶爾森菌的生物學特性及宿主散布特征，爲預防控制小腸結腸炎耶爾森菌感染提供迷信根據(jù)。

　　一、資料與辦法

　　1.1樣原本源

　　2023年在登封市共采集各類標本1138份。其中，在腹瀉監(jiān)測點采集腹瀉患者糞便569份;在各鄉(xiāng)鎮(zhèn)采集牲畜、家禽糞便標本32份;在定點生豬屠宰場，用已消毒的棉拭子(特制加長)采集剛屠宰后生豬咽拭子及肛內容物394份;采集市場待售肉制品143份。

　　1.2試劑及儀器

　　小腸結腸炎耶爾森菌選擇性培育基和配套抗生素爲美國BD公司產(chǎn)品，0.1mol/L磷酸鹽緩沖溶液(pH7.4，改進PBS)、克氏雙糖鐵瓊脂(KIA)、動力吲哚尿素培育基(MIU)均購自上海市疾病預防控制中心(CDC)，哥倫比亞養(yǎng)分瓊脂購自英國Oxoid公司。小腸結腸炎耶爾森菌分型血清購自日本生研株式會社(包括O∶1、O∶2、O∶3、O∶5、O∶8和O∶9型)，菌株鑒定用的API20E生化板條及配套試劑均購自法國生物梅里埃公司，PCR擴增相關試劑及引物分解來自生工生物工程(上海)股份無限公司。PCR熱循環(huán)儀、電泳儀、瓊脂糖凝膠電泳成像儀均爲美國BioBad公司產(chǎn)品。PCR擴增用Premix、2000bpDNALadder(DL2000)均購自TaKaRa公司。

　　1.3菌株的'別離培育

　　將采集標本于4℃冷增菌培育，辨別于7、14、21d后轉種于小腸結腸炎耶爾森菌選擇性培育基，25℃培育24～36h，挑取疑似菌落轉種于克氏雙糖斜面25℃培育24h，選擇克氏雙糖+/+、不產(chǎn)氣、H2S-，接種于尿素培育基及半固體培育基，選擇尿素酶+、25℃培育動力+、37℃培育動力-，鏡檢爲革蘭陰性桿菌或橢圓或球桿菌細菌，運用API20E腸道菌生化鑒定板條停止菌種鑒定[5-7]。

　　1.4生物分型及血清分型

　　生化反響是小腸結腸炎耶爾森菌鑒定的次要根據(jù)，同時將檢測后果作爲生物分型的根據(jù)。詳細參照文獻[3]停止。對鑒定后果爲小腸結腸炎耶爾森菌的菌株參照文獻[8]停止血清學分型，設鹽水對照。1.5PCR檢測借助PCR檢測技術對小腸結腸炎耶爾森菌黏附侵襲點基因(ail)、耐熱性腸毒素基因(ystA)、生物1A型攜帶的腸毒素基因(ystB)、黏附素(yadA)、yop調理子轉錄活化作用因子(virF)等停止檢測。PCR產(chǎn)物用1.5%瓊脂糖凝膠電泳別離(170V，30min)，引物序列參照文獻[9]停止。攜帶ail+、ystA+、yadA+、virF+、ail+或ystA+等基因的菌株爲致病性菌株，攜帶ystB+、ail-、ystA-、ystB-、yadA-、virF-基因的菌株爲非致病性菌株。

　　二、后果

　　2.1標本檢出狀況

　　2023年采集人、植物宿主糞便、豬咽拭子、豬肛拭子及食品標本共1138份，小腸結腸炎耶爾森菌總檢出率爲14.85%(169/1138)。腹瀉患者、犬、雞糞便的小腸結腸炎耶爾森菌檢出率辨別爲0.70%(4/569)、50.00%(2/4)和13.33%(2/15);豬咽拭子及肛內容物小腸結腸炎耶爾森菌的檢出率爲36.55%(144/394)。食品樣品的小腸結腸炎耶爾森菌檢出率爲11.89%(17/143)。

　　2.2生物分型及血清學分型后果

　　169株小腸結腸炎耶爾森菌經(jīng)API20E生化鑒定板條鑒定，1A生物型占13.61%(23/169)，3型生物型占86.39%(146/169);因血清類型無限，10株菌未停止定型(5.92%)，O∶3血清型占86.39%(146/169)，O∶5血清型占7.69%(13/169)，見表1.

　　2.3毒力基因檢測狀況

　　對169株菌株ail、ystA、ystB、yadA和virF5種毒力基因停止檢測，ail+、ystA+、yadA+、virF+占81.06%(137/169)，ail+、ystA+占5.33%(9/169)，ystB+占12.43%(21/169)，ail-、ystA-、ystB-、yadA-、virF-占1.18%(2/169)。

　　三、討論

　　小腸結腸炎耶爾森菌的爆發(fā)盛行顯示均與食物相關[4]。小腸結腸炎耶爾森菌的致病性與散布在染色體和70kb質粒編碼的毒力因子有關，且需兩因子共同作用使其進入上層淋巴組織定殖，發(fā)揚致病作用[10]。PCR擴增的5種毒力基因有ail、ystA、ystB、yadA、virF等，依據(jù)毒力基因攜帶狀況將小腸結腸炎耶爾森菌分爲致病性菌株及非致病性菌株。2023年登封市別離小腸結腸炎耶爾森菌陽性菌株169株，其致病性菌株(ail+、ystA+、yadA+、virF+、ystA+)占86.39%(146/169)，非致病性菌株(ystB+、ail-、ystA-、ystB-、yadA-、virF-)占13.61%(23/169)，緣由爲在本年度的監(jiān)測中，豬體內的小腸結腸炎耶爾森菌檢出率較高，且均爲致病性菌株。闡明豬是該菌的劣勢宿主，且其體內攜帶的小腸結腸炎耶爾森菌大局部爲致病性菌株，該后果與以往研討后果分歧[7]。小腸結腸炎耶爾森菌血清型較多，我國報道的血清型達58個[11]，以O∶3、O∶5、O∶8和O∶9型菌株爲主。近年來，O∶3型菌株的盛行呈上升趨向[12]。

　　本次監(jiān)測的宿主以O∶3血清型爲主，占86.39%(146/169)。李洪民等[5]調查顯示，O∶3、O∶5血上清型均占13.48%(12株)，O∶8占15.73%(14株)。2023年登封市小腸結腸炎耶爾森菌以O∶3血清型爲主，占81.87%(289株)[6]，與本調查后果分歧。小腸結腸炎耶爾森菌在自然界散布普遍，包括一切的牲畜、家禽和嚙齒類植物等。故登封市在以往的監(jiān)測根底上，應持續(xù)展開牲畜、家禽、患者及重點宿主的帶菌情況調查。

　　本次調查牲畜豬體內的小腸結腸炎耶爾森菌檢出率高達36.55%，與相關報道分歧[9，13]。該后果對當前的小腸結腸炎耶爾森菌疫情防控有重要的迷信指點意義，應增強小腸結腸炎耶爾森菌盛行知識的宣傳，尤其增強對豬的養(yǎng)殖者指點。志謝中國CDC傳染病預防控制所景懷琦研討員及其團隊在課題完成進程中給予協(xié)助。

　　小腸結腸炎耶爾森菌生物學特性2

　　小腸結腸炎耶爾森菌腸桿菌科耶爾森菌屬，為革蘭氏陰性小桿菌，有毒菌株多呈球桿狀，無毒株以桿狀多見。對營養(yǎng)要求不高，能在麥康凱瓊脂上生長，但較其他腸道桿菌生長緩慢，培養(yǎng)的最適宜溫度為28℃，最適pH值為7～8，初次培養(yǎng)菌落為光滑型，通過傳代接種后菌落可能呈粗糙型。

　　本菌具有“嗜冷性”，在水中和低溫下（4℃）能生長，為腸道中能在4℃生長繁殖的少數(shù)細菌之一。因此，食品冷藏保存時，應防止被該菌污染。

　　野生動物、家畜（豬、狗和貓）、牡蠣和水源中都能分離到本菌，亦可從健康人或患者糞便中分離得到，其傳播方式可能與攝入被尿、糞便污染的食物（尤其是肉類）和接觸感染動物等有關。

　　本菌可產(chǎn)生耐熱腸毒素，121℃30分鐘不被破壞，對酸堿穩(wěn)定，pH1～11不失活。腸毒素產(chǎn)生迅速，在25℃下培養(yǎng)12小時，培養(yǎng)基上清液中即有腸毒素產(chǎn)生，24～48小時達高峰。腸毒素是引起腹瀉的主要因素。毒力型菌株均有VW抗原（蛋白脂蛋白復合物），為毒力的重要因子，與侵襲力有關，侵襲力可能是耶爾森菌感染腸道表現(xiàn)的病理基礎。