最新實(shí)驗(yàn)室工作準(zhǔn)則和規(guī)范(4篇)
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實(shí)驗(yàn)室工作準(zhǔn)則和規(guī)范篇一
一、臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的規(guī)范化設(shè)置及其管理
臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的規(guī)范化設(shè)置詳見(jiàn)《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理暫行辦法》(衛(wèi)醫(yī)發(fā)
[2002]10號(hào)文)附件《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室基本設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)》。為避免污染,必須嚴(yán)格遵循《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)》設(shè)置臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室。
臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室四個(gè)隔開(kāi)的工作區(qū)域中每一區(qū)域都須有專用的儀器設(shè)備。各區(qū)域都必須有明確的標(biāo)記,以避免設(shè)備物品如加樣器或試劑等從其各自的區(qū)域內(nèi)移出從而造成不同的工作區(qū)域間設(shè)備物品發(fā)生混淆。進(jìn)入各個(gè)工作區(qū)域必須嚴(yán)格遵循單一方向順序,即只能從試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)(簡(jiǎn)稱擴(kuò)增區(qū))至產(chǎn)物分析區(qū),避免發(fā)生交叉污染。在不同的工作區(qū)域應(yīng)使用不同顏色或有明顯區(qū)別標(biāo)志的工作服,以便于鑒別。此外,當(dāng)工作者離開(kāi)工作區(qū)時(shí),不得將各區(qū)特定的工作服帶出。
清潔方法不當(dāng)也是污染發(fā)生的一個(gè)主要原因,因此實(shí)驗(yàn)室的清潔應(yīng)按試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)至擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)的方向進(jìn)行。不同的實(shí)驗(yàn)區(qū)域應(yīng)有其各自的清潔用具以防止交叉污染。
(一)試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)
下述操作在該區(qū)進(jìn)行:貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備。
貯存試劑和用于標(biāo)本制備的材料應(yīng)直接運(yùn)送至試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū),不能經(jīng)過(guò)產(chǎn)物分析區(qū)。在打開(kāi)含有反應(yīng)混合液的離心管或試管前,應(yīng)將其快速離心數(shù)秒。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi),并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑。當(dāng)貯存試劑溶液經(jīng)檢查可用后,應(yīng)將其分裝貯存?zhèn)溆茫苊庥捎诮?jīng)常打開(kāi)反應(yīng)管吸液而造成污染。
含反應(yīng)混合液的離心管或試管在冰凍前都應(yīng)快速離心數(shù)秒。大多數(shù)用于擴(kuò)增的試劑都應(yīng)冰凍貯存。為避免因單次反應(yīng)取液而頻繁的凍融主貯存試劑,應(yīng)分裝冰凍貯存試劑溶液。貯存試劑的分裝體積根據(jù)通常在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)一次測(cè)定所需的擴(kuò)增反應(yīng)數(shù)來(lái)決定。
主反應(yīng)混合液的組成成份尤其是聚合酶的適用性和穩(wěn)定性通過(guò)預(yù)試驗(yàn)來(lái)檢查,評(píng)價(jià)結(jié)果必須有書面報(bào)告。對(duì)于“熱啟動(dòng)”技術(shù)(在第一個(gè)高溫變性步驟后加入酶),聚合酶也可不包含在主反應(yīng)混合液中。
在整個(gè)本區(qū)的實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中,操作者必須戴手套,并經(jīng)常更換。此外,操作中使用一次性帽子也是一個(gè)有效地防止污染的措施。
嚴(yán)禁用嘴吸取液體,加樣器和吸頭等必須經(jīng)高壓處理。
工作結(jié)束后必須立即對(duì)工作區(qū)進(jìn)行清潔。本工作區(qū)的實(shí)驗(yàn)臺(tái)表面應(yīng)可耐受諸如次氯酸鈉的化學(xué)物質(zhì)的消毒清潔作用。實(shí)驗(yàn)臺(tái)表面的紫外照射應(yīng)方便有效。由于紫外照射的距離和能量對(duì)去污染的效果非常關(guān)鍵,因此可使用可移動(dòng)紫外燈(254nm波長(zhǎng)),在工作完成后調(diào)至實(shí)驗(yàn)臺(tái)上60~90cm內(nèi)照射。由于擴(kuò)增產(chǎn)物僅幾百bp,對(duì)紫外線損傷不敏感,因此紫外照射擴(kuò)增片段必須延長(zhǎng)照射時(shí)間,最好是照射過(guò)夜。實(shí)驗(yàn)室及其設(shè)備的使用必須有日常記錄。
(二)標(biāo)本制備區(qū)
下述操作在該區(qū)進(jìn)行:臨床標(biāo)本的保存,核酸(rna、dna)提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測(cè)定rna時(shí)cdna的合成。
要正確使用加樣器。由于在加樣操作中可能會(huì)發(fā)生氣溶膠所致的污染,所以應(yīng)避免在本區(qū)內(nèi)不必要的走動(dòng)?赏ㄟ^(guò)在本區(qū)內(nèi)設(shè)立正壓條件避免從鄰近區(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染。為避免樣本間的交叉污染,加 1
入待測(cè)核酸后,必須蓋好含反應(yīng)混合液的反應(yīng)管。對(duì)具有潛在傳染危險(xiǎn)性的材料,必須有明確的樣本處理和滅活程序。
用過(guò)的加樣器吸頭必須放入專門的消毒(例如含次氯酸鈉溶液)容器內(nèi)。實(shí)驗(yàn)室桌椅表面每次工作后都要清潔,實(shí)驗(yàn)材料(原始血標(biāo)本、血清標(biāo)本、提取中的標(biāo)本與試劑的混合液等)如出現(xiàn)外濺,則必須分別處理并作出記錄。
對(duì)實(shí)驗(yàn)臺(tái)適當(dāng)?shù)淖贤庹丈?254nm波長(zhǎng),與工作臺(tái)面近距離)適合于滅活去污染。可移動(dòng)紫外線管燈可用來(lái)確保工作后對(duì)實(shí)驗(yàn)臺(tái)面的充分照射。
樣本處理對(duì)核酸擴(kuò)增有很大影響,必須使用有效的核酸提取方法,可在開(kāi)展臨床標(biāo)本檢測(cè)前對(duì)提取方法進(jìn)行評(píng)價(jià)。
用于rna擴(kuò)增檢測(cè)的樣本制備好以后,應(yīng)立即進(jìn)行cdna合成,因?yàn)閏dna鏈較rna穩(wěn)定,保存相對(duì)容易。為保證逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的需要,應(yīng)在標(biāo)本制備區(qū)設(shè)置一個(gè)以上的溫育裝置。
cdna合成的理想溫度依所使用的酶而定,傾向于使用一步法:即使用在擴(kuò)增反應(yīng)緩沖液條件下具有逆轉(zhuǎn)錄活性的熱穩(wěn)定的dna聚合酶進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,其較cdna合成后再開(kāi)蓋以調(diào)節(jié)緩沖液或加入聚合酶進(jìn)行擴(kuò)增發(fā)生污染的可能性降低。
待測(cè)rna的cdna拷貝須保存在標(biāo)本制備區(qū),不得在本區(qū)對(duì)樣本進(jìn)行pcr擴(kuò)增。
(三)擴(kuò)增區(qū)
下述工作在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行:dna或cdna擴(kuò)增。此外,已制備的dna模板和合成的cdna(來(lái)自樣本制備區(qū))的加入和主反應(yīng)混合液(來(lái)自試劑貯存和制備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。在巢式pcr測(cè)定中,通常在第一輪擴(kuò)增后必須打開(kāi)反應(yīng)管,因此巢式擴(kuò)增有較高的污染危險(xiǎn)性,第二次加樣必須在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。
不能從本區(qū)再進(jìn)入任何“上游”區(qū)域,可降低本區(qū)的氣壓以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。
為避免氣溶膠所致的污染,應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的走動(dòng)。如有加樣則應(yīng)在超凈臺(tái)內(nèi)進(jìn)行。打開(kāi)預(yù)處理過(guò)的反應(yīng)混合液時(shí)必須防止液體濺出,尤其是在巢式擴(kuò)增步驟之間。一個(gè)簡(jiǎn)單的方法是在打開(kāi)反應(yīng)管前快速離心數(shù)秒。可使用體積較小的離心機(jī),因其所占實(shí)驗(yàn)臺(tái)面小,易于用一只手操作,適合于大多數(shù)超凈臺(tái)。防潮屏障如石蠟油或輕礦物油也具有防污染作用,但必須注意的是,礦物油本身也可能成為一種持續(xù)性的污染源。用過(guò)的加樣器必須注意清潔消毒。
完成操作及每天工作后都必須對(duì)實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面進(jìn)行清潔和消毒,紫外照射方法與前面區(qū)域相同。如有溶液濺出,必須處理并作出記錄。
(四)擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)
下述操作在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行:擴(kuò)增片段的測(cè)定。
核酸擴(kuò)增后產(chǎn)物的分析方法多種多樣,如膜上或微孔板上探針雜交方法(同位素標(biāo)記或非同位素標(biāo)記)、瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、southern轉(zhuǎn)移、核酸測(cè)序方法等。目前國(guó)內(nèi)的商品試劑盒絕大部分均采用非同位素標(biāo)記的微孔板上探針雜交方法,即pcr-elisa方法,也有膜上探針雜交方法。
本區(qū)是最主要的擴(kuò)增產(chǎn)物污染來(lái)源,因此必須注意避免通過(guò)本區(qū)的物品及工作服將擴(kuò)增產(chǎn)物帶出。在使用pcr-elisa方法檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物時(shí),必須使用洗板機(jī)洗板,廢液必須收集至1mol/l hc1中,并且不能在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)傾倒,而應(yīng)至遠(yuǎn)離pcr實(shí)驗(yàn)室的地方棄掉。用過(guò)的吸頭也必須放至1mol/l hcl中浸泡后再放到垃圾袋中按程序處理,如焚燒。
由于本區(qū)有可能會(huì)用到某些可致基因突變和有毒物質(zhì)如溴化乙錠、丙烯酰胺、甲醛或同位素等,故應(yīng)注意實(shí)驗(yàn)人員的安全防護(hù)。
本區(qū)的清潔消毒和紫外照射方法同前面區(qū)域。本區(qū)如采用負(fù)壓條件或減壓情況下(如安裝排風(fēng)扇)可減少擴(kuò)增產(chǎn)物從本區(qū)擴(kuò)散至前面區(qū)域的可能性。
二、臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量保證
臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量保證涉及到整個(gè)基因擴(kuò)增檢驗(yàn)的所有階段,即測(cè)定分析前的標(biāo)本采集處理、測(cè)定中的核酸提取、擴(kuò)增和產(chǎn)物分析以及測(cè)定后的結(jié)果報(bào)告等。
(一)標(biāo)本的采集
常用于基因擴(kuò)增檢測(cè)的臨床標(biāo)本包括edta或枸櫞酸鈉抗凝全血或骨髓、血清或血漿、痰、腦脊液、尿及分泌物等。采血液等樣本時(shí),應(yīng)使用一次性密閉容器,如真空采血管。當(dāng)使用非密閉采樣系統(tǒng)時(shí),如尿、分泌物和骨髓的采樣,必須注意防止來(lái)自采樣者的皮屑或分泌物的污染。采樣時(shí)必須戴一次性手套。玻璃器皿在使用前應(yīng)高壓處理,因?yàn)椴A髅蟪:胁灰资Щ畹膔na酶。最好是熱滅菌,250℃烘烤4小時(shí)以上可使rna酶永久性失活。
全血和骨髓標(biāo)本必須進(jìn)行抗凝處理。edta和枸櫞酸鹽是首選的抗凝劑。不能使用肝素抗凝,因?yàn)楦嗡厥莟aq酶的強(qiáng)抑制劑,而且在其后的核酸提取步驟中很難去除。
臨床用于rna(如hcv rna)擴(kuò)增檢測(cè)的血標(biāo)本建議進(jìn)行抗凝處理,并盡快(3小時(shí)以內(nèi))分離血漿,以避免rna的降解。如未作抗凝處理,則抽血后,必須在1小時(shí)內(nèi)分離血清。
(二)標(biāo)本的穩(wěn)定化處理
用于dna擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)本,采集后一般不需要特殊的穩(wěn)定化處理,但標(biāo)本應(yīng)及時(shí)送至實(shí)驗(yàn)室。由于rna易受rna酶的降解,因此用于rna測(cè)定的標(biāo)本有時(shí)必須進(jìn)行穩(wěn)定化處理,如流行病學(xué)調(diào)查的現(xiàn)場(chǎng)采樣。異硫氰酸胍鹽(guanidine thiocyanate,gitc)可使dna酶和rna酶立即失活,因此在采集標(biāo)本時(shí),可將標(biāo)本材料如血清或血漿按1:4的比例加至含有5mol/l gitc的試管中,從而使血清(漿)中的rna酶不可逆失活。經(jīng)上述穩(wěn)定化處理后,標(biāo)本一般不需要冷藏即可郵寄。對(duì)于特定的檢測(cè)項(xiàng)目,上述穩(wěn)定化處理方法的效果究竟如何,要使用相應(yīng)的逆轉(zhuǎn)錄pcr測(cè)定方法來(lái)評(píng)價(jià)。
(三)標(biāo)本的運(yùn)送
標(biāo)本采集后必須盡快送至實(shí)驗(yàn)室。經(jīng)過(guò)適當(dāng)穩(wěn)定化處理的標(biāo)本可在常溫下通過(guò)郵寄運(yùn)送。如用于dna擴(kuò)增檢測(cè)的edta抗凝全血標(biāo)本及用于rna擴(kuò)增檢測(cè)的經(jīng)gitc穩(wěn)定化處理的標(biāo)本。通常在運(yùn)送時(shí),應(yīng)采用不易破碎的容器裝載標(biāo)本。用于rna檢測(cè)的標(biāo)本,如果未經(jīng)穩(wěn)定化處理,則必須速凍后,放在干冰中運(yùn)送。
(四)標(biāo)本的貯存
臨床體液標(biāo)本如血清/血漿等可于-70℃下長(zhǎng)時(shí)間貯存。用于dna測(cè)定的已純化核酸樣本可在10mmol/l tris-1 mmol/l edta緩沖液(ph 7.5-8.0)中4℃保存。用于rna測(cè)定的已純化核酸樣本應(yīng)在緩沖液中-80℃或液氮中貯存。用乙醇沉淀的核酸樣本貯存在-20℃即可。用gitc處理的rna標(biāo)本在室溫可保存7天。
(五)標(biāo)本的處理(核酸提取)
標(biāo)本處理即核酸提取純化是決定擴(kuò)增檢測(cè)成敗的關(guān)鍵性步驟,在使用商品核酸提取試劑提取臨床標(biāo)本中的核酸模板前,應(yīng)對(duì)其進(jìn)行充分評(píng)價(jià)以驗(yàn)證其提取的有效性。通常,核酸制備質(zhì)量不高是由于抑制物去除不完全所致,抑制物可能來(lái)源于標(biāo)本本身(如血紅素及其前體或降解產(chǎn)物)或核酸提取過(guò)程中殘留的有機(jī)
溶劑(如酚、氯仿等),這些物質(zhì)對(duì)其后的taq酶擴(kuò)增反應(yīng)步驟具有強(qiáng)烈的抑制作用,從而影響靶核酸的擴(kuò)增測(cè)定。當(dāng)標(biāo)本為痰時(shí),則必須先進(jìn)行液化處理,再提取核酸。需注意的是,液化時(shí)不能加熱,液化時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)。此外,當(dāng)靶核酸為rna時(shí),逆轉(zhuǎn)錄pcr測(cè)定失敗的常見(jiàn)原因是標(biāo)本在運(yùn)送前未經(jīng)充分的穩(wěn)定化處理及核酸提取試劑的rna酶的污染。對(duì)于前者,要核查測(cè)定分析前的步驟,如果發(fā)現(xiàn)有rna降解的證據(jù),實(shí)驗(yàn)室則應(yīng)拒絕接受標(biāo)本,要求重新采取標(biāo)本,并對(duì)運(yùn)送者給以詳細(xì)的指導(dǎo)。對(duì)于后者,建議使用高質(zhì)量的商品核酸提取試劑。
(六)靶核酸的逆轉(zhuǎn)錄(rt)和擴(kuò)增
1、靶rna的逆轉(zhuǎn)錄
cdna合成為逆轉(zhuǎn)錄pcr中的第一個(gè)酶反應(yīng)步驟,所產(chǎn)生的cdna為靶rna的反向互補(bǔ)鏈,為后面擴(kuò)增的模板。下述因素通常影響cdna合成的效率:(1)逆轉(zhuǎn)錄效率的降低或完全缺乏。其可能的原因有逆轉(zhuǎn)錄酶質(zhì)量不高、試劑降解變質(zhì)或加樣錯(cuò)誤等;(2)用于逆轉(zhuǎn)錄的標(biāo)本中存在逆轉(zhuǎn)錄或taq酶的抑制物(如酚、氯仿、血紅素等);(3)rna酶的存在導(dǎo)致rna的降解。
2、核酸的擴(kuò)增
有多種因素可引起核酸擴(kuò)增檢測(cè)的假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果,如擴(kuò)增靶核酸中抑制劑存在、taq酶失活、退火溫度不對(duì)、mg++濃度不佳、患者標(biāo)本或試劑受污染等。擴(kuò)增儀孔中熱傳導(dǎo)的均一性極為重要,必須定期對(duì)擴(kuò)增儀的溫度控制和加熱模塊中熱傳導(dǎo)的一致性進(jìn)行檢查,以避免假陰性結(jié)果。
(七)污染
在實(shí)際工作中,常見(jiàn)有以下幾種污染類型:擴(kuò)增片段的污染(產(chǎn)物污染);天然基因組dna的污染、試劑污染(貯存液或工作液)以及標(biāo)本間交叉污染(如氣溶膠從一個(gè)陽(yáng)性標(biāo)本擴(kuò)散到原本陰性的標(biāo)本)。臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室中污染的最主要來(lái)源是擴(kuò)增產(chǎn)物的污染。
由于一旦發(fā)生污染后,再圍繞實(shí)驗(yàn)室來(lái)尋找污染源不僅耗時(shí)而且還很繁瑣,所以防止污染重在預(yù)防。但如果發(fā)生了污染,實(shí)驗(yàn)就必須停止,直到發(fā)現(xiàn)了污染源為止,并且實(shí)驗(yàn)結(jié)果必須作廢。
1、測(cè)定分析前的污染源
測(cè)定分析前實(shí)驗(yàn)材料的污染主要來(lái)自非病人標(biāo)本來(lái)源的核酸。
2、測(cè)定分析階段的污染源
通常,測(cè)定分析階段的每一步都可能發(fā)生對(duì)樣本的污染。反應(yīng)混合液的任何成分及核酸的制備和反應(yīng)建立階段所涉及到的實(shí)驗(yàn)設(shè)備的任何部位都是可能的污染源。如受污染的試劑(例如牛血清白蛋白,明膠或礦物油)、商品酶制劑、消耗品(如反應(yīng)管,吸頭)和實(shí)驗(yàn)設(shè)備(如加樣器、離心機(jī))等。
在前面三個(gè)工作區(qū)中,不當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)操作會(huì)引起所使用的試劑、消耗品或?qū)嶒?yàn)設(shè)備的污染。而在產(chǎn)物分析區(qū),當(dāng)吸取擴(kuò)增產(chǎn)物用于檢測(cè)時(shí),非常容易引起污染,因此必須制定標(biāo)準(zhǔn)操作程序(sop),并嚴(yán)格執(zhí)行。
3、污染的避免
要避免污染,首先應(yīng)是預(yù)防而不是排除污染,前面所述對(duì)工作區(qū)的嚴(yán)格劃分的目的即是為了預(yù)防污染。為避免以前測(cè)定中所產(chǎn)生的擴(kuò)增產(chǎn)物的污染,可設(shè)法將其破壞掉。如在擴(kuò)增反應(yīng)中用dutp取代部分dttp,使得產(chǎn)生的特異擴(kuò)增片段含有尿嘧啶,這樣擴(kuò)增前在反應(yīng)混合液中加入尿嘧啶糖苷酶(ung),可破壞來(lái)自以前測(cè)定的擴(kuò)增產(chǎn)物,從而避免其對(duì)以后要進(jìn)行的擴(kuò)增測(cè)定的污染。另外一種方法是持續(xù)的長(zhǎng)波紫外燈照射,通過(guò)異補(bǔ)骨脂素光化學(xué)產(chǎn)生dna加合物,由于dna加合物對(duì)擴(kuò)增沒(méi)有反應(yīng)但又不妨礙pcr后雜交過(guò)程,所以這種方法也能防止污染。
上述防污染方法只在一定程度上有效,所以不能用其來(lái)替代嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室設(shè)置和管理,尤其是這些方法不能防止外來(lái)非擴(kuò)增的天然dna的污染。
4、去除污染的措施
工作完后必須定期對(duì)實(shí)驗(yàn)室采取有效的去污染措施,結(jié)合各種不同的方法可達(dá)到最佳效果。去污染措施包括但不僅限下面幾種:(1)用10%(v/v)次氯酸鈉清潔表面;(2)試驗(yàn)后長(zhǎng)時(shí)間的紫外照射實(shí)驗(yàn)操作臺(tái)面和其他表面;(3)實(shí)驗(yàn)設(shè)備如加樣器的高壓消毒。
(八)擴(kuò)增產(chǎn)物的分析
擴(kuò)增產(chǎn)物的測(cè)定有各種方法,如電泳、限制性酶切、斑點(diǎn)印跡、探針雜交、測(cè)序、分光光度法定量等,但臨床pcr檢驗(yàn)項(xiàng)目基本上都使用探針雜交方法。
雜交結(jié)果不充分的原因可能是基因探針不合適、標(biāo)記方法不對(duì)、對(duì)探針的標(biāo)記不夠、雜交或洗滌方法不合適等。
最常使用的基因探針有:dna片段、合成的寡核苷酸和體外轉(zhuǎn)錄的反義rna探針。探針的標(biāo)記物常用的有生物素、地高辛、熒光素和同位素等。
在擴(kuò)增后的雜交檢測(cè)中, 應(yīng)該嚴(yán)格遵守商品試劑盒確定的雜交程序和雜交條件。溫度太低或離子強(qiáng)度太高都會(huì)降低雜交的嚴(yán)格性,還會(huì)給檢測(cè)信號(hào)的特異性帶來(lái)負(fù)面影響。相反,提高溫度和/或降低離子強(qiáng)度會(huì)增加雜交的嚴(yán)格性。因此,嚴(yán)密控制溫度和試劑的離子強(qiáng)度是避免假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果的先決條件。要注意的是,溫度和離子強(qiáng)度不能同時(shí)改變。
(九)質(zhì)量控制
質(zhì)量控制包括兩個(gè)方面,即室內(nèi)質(zhì)量控制(以下簡(jiǎn)稱質(zhì)控)和室間質(zhì)量評(píng)價(jià)。
1、室內(nèi)質(zhì)量控制
必須對(duì)dna和rna分析的各步進(jìn)行質(zhì)量控制,以避免假陽(yáng)性和假陰性,保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。由于核酸擴(kuò)增測(cè)定的高敏感性,所以標(biāo)本制備、逆轉(zhuǎn)錄、擴(kuò)增本身和產(chǎn)物分析中的每一步都要求有質(zhì)控措施。
(1)標(biāo)本制備:
常用瓊脂糖凝膠電泳來(lái)檢測(cè)dna提取效果,以判斷所提取的dna是否發(fā)生降解。用常規(guī)的手工提取方法制備的dna的平均長(zhǎng)度一般為~100kb,用適合pcr的dna提取試劑盒制備的dna的長(zhǎng)度平均范圍為30-40kb。明顯出現(xiàn)降解的dna(在1和10kb的低分子量范圍內(nèi))在經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳分離和用溴化乙錠染色后也可見(jiàn)強(qiáng)的熒光信號(hào)。用對(duì)甲基化不敏感的限制性內(nèi)切酶(如ecori)消化dna,然后電泳分離,能夠?qū)γ富钚缘囊种苿┻M(jìn)行質(zhì)控(在抑制劑存在的情況下,高分子量的片段不被酶切)。潛在的抑制劑的存在通常用260nm和280nm的分光光度測(cè)定來(lái)估計(jì),質(zhì)量好的dna提取物,a260/a280比值應(yīng)該在1.75~2.0之間;否則,殘留的蛋白或酚可能會(huì)很高。僅用光度計(jì)比色方法不能對(duì)dna的完整性下結(jié)論。
最快的對(duì)總rna提取質(zhì)量控制的方法是在非變性條件下作瓊脂糖凝膠電泳,這一點(diǎn)跟dna分離相同。但如果對(duì)結(jié)果有疑問(wèn),就應(yīng)該在變性的條件下作瓊脂糖凝膠電泳以檢測(cè)rna的完整性。在理想情況下,三種主要的核糖體rna(28s、18s和5s)在凝膠上出現(xiàn)的帶相對(duì)較窄。如發(fā)生rna的降解,則出現(xiàn)大量低分子量帶或出現(xiàn)帶的消失。測(cè)定核糖體rna帶的密度指數(shù)可作為對(duì)rna制備的質(zhì)量評(píng)價(jià)的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn);對(duì)向低分子量拖尾的、不對(duì)稱性的峰的評(píng)估也是rna完整性的合適的指標(biāo)。另外,瓊脂糖凝膠電泳能顯示出在rna的制備中被dna污染的程度。由于這些原因,單獨(dú)的光度計(jì)比色方法也不能對(duì)rna的完整性下結(jié)論。
對(duì)于血清(漿)中病毒的測(cè)定,則要評(píng)價(jià)標(biāo)本出現(xiàn)溶血、脂血和黃膽情況下標(biāo)本處理方法對(duì)擴(kuò)增檢測(cè)的影響,避免由于標(biāo)本處理方法的不當(dāng)而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。此外,還可采用已知濃度標(biāo)本評(píng)價(jià)核酸提取方法的效果。
(2)逆轉(zhuǎn)錄和擴(kuò)增:本部份包括陽(yáng)性質(zhì)控和陰性質(zhì)控。
對(duì)逆轉(zhuǎn)錄和核酸擴(kuò)增的質(zhì)控既可使用內(nèi)標(biāo)質(zhì)控方法也可采用外標(biāo)質(zhì)控方法。逆轉(zhuǎn)錄-擴(kuò)增檢測(cè)的內(nèi)標(biāo)通常為在整個(gè)細(xì)胞周期中均勻表達(dá)的mrna,如hla、β肌動(dòng)蛋白和組蛋白h2.3的mrna或14s rrna等。此外,也可在標(biāo)本制備時(shí)將外來(lái)內(nèi)標(biāo)加入到樣本中共同提取、逆轉(zhuǎn)錄及擴(kuò)增。當(dāng)標(biāo)本中存在逆轉(zhuǎn)錄抑制物,或核酸提取中發(fā)生rna降解,或逆轉(zhuǎn)錄酶失活,內(nèi)標(biāo)即會(huì)表現(xiàn)為陰性結(jié)果。
對(duì)于dna測(cè)定內(nèi)標(biāo)可使用對(duì)有機(jī)體存活所必須的靶基因,如維生素d血漿結(jié)合蛋白的基因。對(duì)于病原體的基因檢測(cè),內(nèi)標(biāo)多采用人工制備的競(jìng)爭(zhēng)性內(nèi)標(biāo)。內(nèi)標(biāo)可以監(jiān)控每一擴(kuò)增孔中假陰性的產(chǎn)生情況。
目前的商品試劑盒大部分沒(méi)采用內(nèi)標(biāo)方法質(zhì)控。因此在測(cè)定血清/血漿病原體核酸如hbv dna、hcv rna等時(shí),應(yīng)使用已知的弱陽(yáng)性血清/血漿作為質(zhì)控樣本,與待測(cè)臨床標(biāo)本等同處理提取核酸及擴(kuò)增,以判斷逆轉(zhuǎn)錄及擴(kuò)增檢測(cè)的效果。
使用這些外加弱陽(yáng)性質(zhì)控不但可檢測(cè)擴(kuò)增反應(yīng)液的質(zhì)量,還可獲得有關(guān)pcr試劑的檢測(cè)下限和特異性的信息。這些質(zhì)控樣本在擴(kuò)增檢測(cè)時(shí)必須使用與患者的標(biāo)本相同的主反應(yīng)混合液。
每一個(gè)pcr實(shí)驗(yàn)中都必須設(shè)有外加陰性質(zhì)控(污染監(jiān)測(cè)質(zhì)控),為判斷擴(kuò)增過(guò)程中污染出現(xiàn)的階段,陰性質(zhì)控可包括如下幾種,即在樣品制備的整個(gè)過(guò)程中所帶的空白管、僅有擴(kuò)增反應(yīng)液但不含擴(kuò)增模板的反應(yīng)管、陰性標(biāo)本等。陰性標(biāo)本可以評(píng)估pcr實(shí)驗(yàn)的綜合質(zhì)量。
在擴(kuò)增靶rna的rt-pcr實(shí)驗(yàn)中,可做省略逆轉(zhuǎn)錄的污染質(zhì)控,通過(guò)這種方法,可發(fā)現(xiàn)以前擴(kuò)增的dna片段所引起的污染。
(3)板上雜交和膜上斑點(diǎn)印跡雜交的質(zhì)控:在板上雜交和斑點(diǎn)雜交時(shí),陽(yáng)性和陰性質(zhì)控應(yīng)該在同一板或膜上與病人標(biāo)本平行進(jìn)行分析,這可排除不同反應(yīng)中因使用不同雜交條件所致的對(duì)結(jié)果的錯(cuò)誤解釋。
(4)測(cè)定結(jié)果的評(píng)價(jià)與報(bào)告:采用實(shí)時(shí)熒光定量pcr檢測(cè)方法,在判斷結(jié)果時(shí),應(yīng)先對(duì)擴(kuò)增的熒光信號(hào)作出定性判斷,然后再進(jìn)行定量分析,避免一些非特異熒光信號(hào)對(duì)結(jié)果分析的干擾。
結(jié)果的報(bào)告必須簡(jiǎn)單清楚。定性測(cè)定報(bào)告“陽(yáng)性”或“陰性”即可。定量測(cè)定則必須報(bào)告量的多少,如結(jié)果高于測(cè)定方法線性范圍上限,則對(duì)樣本稀釋后再測(cè),結(jié)果乘上稀釋倍數(shù);如結(jié)果低于方法的測(cè)定范圍下限,則報(bào)?lt;多少即可,不能報(bào)告為“0”或“陰性”。
2、室間質(zhì)量評(píng)價(jià)
所有開(kāi)展臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室都必須參加由衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心組織的全國(guó)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)項(xiàng)目的室間質(zhì)量評(píng)價(jià),評(píng)價(jià)結(jié)果將作為其開(kāi)展臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)的依據(jù)之一。
本工作規(guī)范自公布之日起實(shí)施。
實(shí)驗(yàn)室工作準(zhǔn)則和規(guī)范篇二
常州工學(xué)院實(shí)驗(yàn)室安全工作規(guī)范
1.做好實(shí)驗(yàn)室的安全工作,是教學(xué)和科研工作的保證。各實(shí)驗(yàn)室必須牢固樹(shù)立“安全第一”的觀點(diǎn),加強(qiáng)安全制度教育,重視安全技術(shù)工作。各二級(jí)學(xué)院(直屬學(xué)部)分管實(shí)驗(yàn)室工作的院長(zhǎng)負(fù)責(zé)此項(xiàng)工作。
2.每個(gè)實(shí)驗(yàn)室設(shè)一名兼職安全員。安全員對(duì)不符合規(guī)定的操作或不利于安全的問(wèn)題,有權(quán)提出詢問(wèn);對(duì)不聽(tīng)勸告或有礙安全的人,有權(quán)停止其操作。
3.各實(shí)驗(yàn)室根據(jù)各自特點(diǎn),建立安全操作規(guī)程和防火、防盜制度,要落實(shí)到人,明確職責(zé)。定期填寫《實(shí)驗(yàn)室安全檢查記錄》。
4.為確保實(shí)驗(yàn)室工作人員的安全與身心健康,實(shí)驗(yàn)室根據(jù)各自情況,對(duì)涉及易燃物、易爆物、煙、毒、粉塵、有毒氣體、放射性物質(zhì)、高頻電流、超高電壓、大幅度振動(dòng)、強(qiáng)烈持續(xù)噪音、高溫、高壓、熱輻射、極強(qiáng)光閃爍等各種場(chǎng)合或有關(guān)設(shè)備,制定出嚴(yán)格的操作規(guī)章制度,并采取相應(yīng)的勞動(dòng)保護(hù)措施,由安全員負(fù)責(zé)監(jiān)督執(zhí)行。
5.由于官僚主義、違章操作、玩忽職守、忽視安全而造成失火、被盜、嚴(yán)重污染、中毒、人身重大傷害、精密貴重設(shè)備儀器嚴(yán)重?fù)p壞等重大事故時(shí),實(shí)驗(yàn)室要保護(hù)好現(xiàn)場(chǎng),并立即向二級(jí)學(xué)院(直屬學(xué)部)、學(xué)校報(bào)告。學(xué)校對(duì)事故責(zé)任人作出嚴(yán)肅處理,處理結(jié)果按規(guī)定逐級(jí)上報(bào),對(duì)隱瞞不報(bào)及縮小或擴(kuò)大事故真相者,應(yīng)予嚴(yán)肅處理。
6.實(shí)驗(yàn)室使用的化學(xué)藥品、易燃、易爆和劇毒危險(xiǎn)品,要按規(guī)定設(shè)專用庫(kù)房存放,并指定專人(兩人)妥善保管。領(lǐng)用時(shí)要嚴(yán)格把關(guān),嚴(yán)密手續(xù);必須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室主任簽署意見(jiàn),方可領(lǐng)用。同時(shí),要規(guī)定有專人使用,要有可靠的安全防范措施。
7.各種安全防范措施要準(zhǔn)備齊全,各種安全規(guī)章制度要張貼到墻,各種安全設(shè)施不準(zhǔn)任何人以任何借口借用或挪用。
8.學(xué)生初次進(jìn)實(shí)驗(yàn)室做實(shí)驗(yàn)前,實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)人員必須宣講安全制度,不經(jīng)安全規(guī)章教育者,不得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。
9.每學(xué)期,各二級(jí)學(xué)院(直屬學(xué)部)分管院長(zhǎng)應(yīng)組織對(duì)實(shí)驗(yàn)室安全工作情況進(jìn)行一次全面性的認(rèn)真檢查。查出的不安全隱患要采取措施消除。各部門要各負(fù)其責(zé),對(duì)應(yīng)該解決的問(wèn)題要限期解決,對(duì)一時(shí)解決不了的問(wèn)題,有關(guān)部門要采取臨時(shí)防范措施。
實(shí)驗(yàn)室工作準(zhǔn)則和規(guī)范篇三
1、目的
為了營(yíng)造一個(gè)安全有效、秩序良好的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境,達(dá)到“科學(xué)、規(guī)范、安全、高效”的目的,特制訂本實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)定。
2、適用范圍 規(guī)定適用于進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室內(nèi)所有人員。
3、實(shí)驗(yàn)室管理人員職責(zé)
負(fù)責(zé)公司新產(chǎn)品研發(fā)實(shí)驗(yàn)、調(diào)試、驗(yàn)證和測(cè)試等研發(fā)任務(wù)。3.1實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人 3.1.1負(fù)責(zé)實(shí)驗(yàn)室日常管理,組織安排測(cè)試任務(wù)順利進(jìn)行;
3.1.2負(fù)責(zé)管理實(shí)驗(yàn)室業(yè)務(wù)流程,指導(dǎo)分析人員及時(shí)、準(zhǔn)確的完成各項(xiàng)分析工作;
3.1.3負(fù)責(zé)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制,維護(hù)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系,審核、監(jiān)控測(cè)試數(shù)據(jù)和結(jié)果;
3.1.4負(fù)責(zé)實(shí)驗(yàn)室安全檢查與突發(fā)事件處理;
3.1.5負(fù)責(zé)監(jiān)督檢查實(shí)驗(yàn)室日常衛(wèi)生,有權(quán)安排本實(shí)驗(yàn)室所有相關(guān)人員嚴(yán)格執(zhí)行實(shí)驗(yàn)室日常衛(wèi)生制度。
3.1.6負(fù)責(zé)儀器設(shè)備的驗(yàn)收和臺(tái)帳建檔工作;
3.1.7負(fù)責(zé)儀器設(shè)備的使用、維護(hù)、期間核查和周期檢定; 3.1.8負(fù)責(zé)儀器設(shè)備在檢定周期內(nèi)使用和檢驗(yàn)標(biāo)識(shí)的管理;
4、實(shí)驗(yàn)室管理辦法
4.1實(shí)驗(yàn)室工作人員必須嚴(yán)格遵守國(guó)家安全法規(guī)和公司有關(guān)制度,確保安全文明從事研發(fā)工作。
4.2實(shí)驗(yàn)室出口、走廊是安全通道,任何時(shí)候應(yīng)保持暢通。實(shí)驗(yàn)室配置的滅火器、消防砂、消防水帶等供消防使用,任何部門或個(gè)人不能隨便移動(dòng)或挪作它用。4.3實(shí)驗(yàn)室要保持整潔、安靜,物品擺設(shè)要整齊、規(guī)范、科學(xué),做好四防、五
設(shè)備)。
4.4所有進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的人員應(yīng)服從實(shí)驗(yàn)室管理人員安排,采取必要安全措施,保證人身及儀器設(shè)備的安全。
4.5實(shí)驗(yàn)室的儀器設(shè)備,未經(jīng)管理人員許可,任何人不得擅自開(kāi)關(guān)、使用和移動(dòng)實(shí)驗(yàn)室中的任何設(shè)備。
4.6對(duì)于有規(guī)定的預(yù)熱時(shí)間的儀器設(shè)備,使用設(shè)備的人員必須提前預(yù)熱登記。4.7不得將與實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)人員帶入實(shí)驗(yàn)室。
4.8由于責(zé)任事故造成儀器設(shè)備的損壞,要追究使用人的責(zé)任。
5、實(shí)驗(yàn)室安全管理制度
5.1實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定相應(yīng)實(shí)驗(yàn)室規(guī)則及實(shí)驗(yàn)室安全制度。根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室情況制定嚴(yán)格的操作規(guī)程及防火、防盜管理制度,實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部人員要嚴(yán)格執(zhí)行。進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的外來(lái)人員都必須遵守實(shí)驗(yàn)室有關(guān)的規(guī)章制度。
5.2實(shí)驗(yàn)室工作人員及參加實(shí)驗(yàn)的人員必須認(rèn)真學(xué)習(xí)實(shí)驗(yàn)儀器的安全技術(shù)操作規(guī)程,熟悉各儀器使用方法及注意事項(xiàng)。
5.3所有藥品、試劑都有指定位置,藥品、試劑使用和購(gòu)買后要放入指定位置,各種藥品、試劑要有正確清晰的標(biāo)簽,包括名稱、濃度、規(guī)格等,按正確方法取用。
5.4實(shí)驗(yàn)室應(yīng)指定專人負(fù)責(zé)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備及人身的安全。負(fù)責(zé)本室的安全技術(shù)監(jiān)督、檢查工作;對(duì)于貴重精密儀器設(shè)備、危險(xiǎn)物品,應(yīng)由具有業(yè)務(wù)能力的專人負(fù)責(zé)操作。
5.5來(lái)實(shí)驗(yàn)室工作的人員,必須有實(shí)驗(yàn)室工作人員在場(chǎng)或經(jīng)過(guò)上機(jī)操作培訓(xùn)與
實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室應(yīng)穿著實(shí)驗(yàn)服。與實(shí)驗(yàn)室工作無(wú)關(guān)的人員不得擅自進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,外單位來(lái)訪人員如需進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,必須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)同意后,才能進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。
5.6不得在實(shí)驗(yàn)室飲食、娛樂(lè),使用化妝品,實(shí)驗(yàn)室操作用的玻璃容器、器皿不能用來(lái)盛載食物和飲料,實(shí)驗(yàn)室的冰箱、冰柜不可存放食物。
5.7實(shí)驗(yàn)室及走廊禁止吸煙,特別是在有易燃、易爆的試劑氣體場(chǎng)所或做有關(guān)實(shí)驗(yàn)時(shí),嚴(yán)禁煙火。
5.8實(shí)驗(yàn)工作結(jié)束后,必須關(guān)好電源、儀器開(kāi)關(guān)。下班前,實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人必須檢查操作的儀器及整個(gè)實(shí)驗(yàn)室的門、窗和不用的水、電、氣路,并確保關(guān)好。清掃易燃的紙屑等雜物,消滅隱患。確認(rèn)安全無(wú)誤,方可離室。節(jié)假日前各室人員應(yīng)進(jìn)行安全檢查,確保實(shí)驗(yàn)室安全。
5.9若儀器設(shè)備在運(yùn)行中,實(shí)驗(yàn)人員不得離開(kāi)現(xiàn)場(chǎng)。對(duì)需要長(zhǎng)時(shí)間連續(xù)進(jìn)行的化學(xué)實(shí)驗(yàn),必須派兩人輪流替換照看。實(shí)驗(yàn)使用過(guò)后廢液、廢碴應(yīng)按規(guī)定收集、排放或到指定地點(diǎn)進(jìn)行處理,禁止將廢溶劑、反應(yīng)廢液向下水道傾倒。5.10對(duì)危險(xiǎn)性大的化學(xué)反應(yīng),如易爆、劇毒等,要經(jīng)過(guò)上級(jí)批準(zhǔn),在安全防范措施具備的條件下進(jìn)行。在進(jìn)行有毒、有害、有刺激性物質(zhì)、有腐蝕性物質(zhì)操作或開(kāi)展易燃等化學(xué)實(shí)驗(yàn)時(shí),應(yīng)戴好防護(hù)手套、防爆面具、防護(hù)鏡,此類實(shí)驗(yàn)操作必須確保兩人以上。
5.11實(shí)驗(yàn)室根據(jù)實(shí)際情況,配備一定數(shù)量的消防器材,消防器材要擺放在明顯、易于取用的位置,并定期檢查,確保有效,嚴(yán)禁將消防器材移作別用。實(shí)驗(yàn)室人員必須熟悉常用滅火器材的使用。如遇火警,除應(yīng)立即采取必要的消防措施滅火外,應(yīng)馬上報(bào)警,并及時(shí)向上級(jí)報(bào)告;鹁獬笠⒁獗Wo(hù)現(xiàn)場(chǎng)。
.12稀釋硫酸時(shí),必須在硬質(zhì)耐熱燒杯或錐形瓶中進(jìn)行,只能將濃硫酸慢慢注入水中,邊倒邊攪拌,溫度過(guò)高時(shí),應(yīng)等冷卻或降溫后再繼續(xù)進(jìn)行,嚴(yán)禁將水倒入硫酸中。
5.13開(kāi)啟易揮發(fā)液體試劑前,先將試劑瓶放在自來(lái)水流中冷卻幾分鐘。開(kāi)啟時(shí)瓶口不要對(duì)人。
4、易燃溶劑加熱時(shí),必須在水浴中進(jìn)行,避免明火。5.14裝強(qiáng)腐蝕性、有毒或易爆物品的器皿,應(yīng)由操作者親自洗凈。
5.15移動(dòng)、開(kāi)啟大瓶液體藥品時(shí),不能將瓶直接放在水泥地板上,最好用橡膠墊或草墊墊好,如為石膏包封的用水泡軟后打開(kāi),嚴(yán)禁錘砸,敲打,以防破裂。5.16用試管加熱液體時(shí),不可將管口對(duì)人, 以免濺出傷人。
5.17將玻璃棒,玻璃管,溫度計(jì)等插入或拔出膠塞膠管時(shí)均應(yīng)墊有棉布, 不可強(qiáng)行插入或拔出,以免折斷傷人。
5.18嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)室鑰匙的管理,鑰匙的配發(fā)應(yīng)由有關(guān)負(fù)責(zé)人統(tǒng)一管理,不得私自借給他人使用或擅自配置鑰匙。
5.19如有盜竊和事故發(fā)生,立即采取措施,及時(shí)處理,必須按規(guī)定上報(bào),不準(zhǔn)隱瞞不報(bào)或拖延上報(bào),重大事故要立即搶救,保護(hù)事故現(xiàn)場(chǎng)。
5.20因人為原因造成實(shí)驗(yàn)室事故的,按有關(guān)規(guī)定對(duì)當(dāng)事人進(jìn)行紀(jì)律處分,并根據(jù)情節(jié)輕重追究有關(guān)人員的經(jīng)濟(jì)和法律責(zé)任。
6、儀器安全管理制度 6. 1儀器設(shè)備的管理
6.1.1儀器設(shè)備購(gòu)入、驗(yàn)收合格后,由管理員辦理入庫(kù)、出庫(kù)手續(xù),并建立《儀器設(shè)備臺(tái)帳》。
6.1.2儀器設(shè)備有檢定規(guī)程,有授權(quán)檢定機(jī)構(gòu)的儀器設(shè)備,應(yīng)送授權(quán)的法定計(jì)量檢定機(jī)構(gòu)檢定或校準(zhǔn);沒(méi)有檢定規(guī)程的儀器設(shè)備,由實(shí)驗(yàn)室按自校或互校方法
6.1.3經(jīng)驗(yàn)收合格,并具有計(jì)量器具許可證(帶cmc標(biāo)志)、樣機(jī)試驗(yàn)報(bào)告、出廠合格證或檢測(cè)報(bào)告(鑒定證書)的測(cè)量?jī)x器,應(yīng)在儀器上加貼合格或準(zhǔn)用標(biāo)志,方可批準(zhǔn)啟用。
6.1.4管理員至少每年兩次對(duì)測(cè)量設(shè)備進(jìn)行核查。
6.1.5復(fù)檢(校)后的檢定(校準(zhǔn)、檢測(cè))證書或報(bào)告原件存入儀器設(shè)備檔案,向使用者提供復(fù)印件。6. 2儀器設(shè)備的使用與操作
6.2.1儀器設(shè)備由專人負(fù)責(zé)人保管。
6.2.2操作者必須掌握所用儀器設(shè)備工作原理、技術(shù)性能、操作規(guī)程、維護(hù)保養(yǎng)等技能。
6.2.3實(shí)驗(yàn)室儀器藥品清整歸位,檢查實(shí)驗(yàn)儀器是否運(yùn)作正常,無(wú)灰塵蛛網(wǎng)及污垢,對(duì)量筒,燒杯等易碎易裂之儀器應(yīng)清點(diǎn)其數(shù)量,并呈報(bào)廢數(shù),根據(jù)清點(diǎn)結(jié)果,對(duì)損壞或缺失儀器藥品進(jìn)行報(bào)修,并及時(shí)請(qǐng)購(gòu)。
6.2.4每臺(tái)儀器設(shè)備必須按照校準(zhǔn)規(guī)范,監(jiān)測(cè)/檢測(cè)規(guī)范、使用說(shuō)明書等制定作業(yè)指導(dǎo)書。
6.2.5貴重儀器設(shè)備的使用者應(yīng)填寫儀器設(shè)備使用記錄表,其內(nèi)容應(yīng)包括:使用時(shí)間、開(kāi)機(jī)目的、使用前后及使用過(guò)程狀況、使用人。
6.2.6凡經(jīng)過(guò)記載有錯(cuò)誤、或顯示的結(jié)果有疑問(wèn)、或通過(guò)檢定等方法證明儀器設(shè)備有缺陷時(shí),應(yīng)立即停止使用,并對(duì)其加以明確停用標(biāo)識(shí),如可能將其貯存在規(guī)定的地方直至修復(fù);修復(fù)的儀器設(shè)備必須經(jīng)校準(zhǔn)、檢定(驗(yàn)證)或檢定證明其功能指標(biāo)已恢復(fù)。
.3儀器設(shè)備的維護(hù)與維修
6.3.1實(shí)驗(yàn)室所有儀器設(shè)備應(yīng)得到正常維護(hù),儀器設(shè)備應(yīng)由專門人員按使用說(shuō)明書和維護(hù)程序的要求給予維護(hù)。
6.3.2送檢的監(jiān)測(cè)儀器設(shè)備取回驗(yàn)收后,應(yīng)給予維護(hù)和檢查。
6.3.3儀器設(shè)備應(yīng)建立儀器設(shè)備使用維修檔案,記錄設(shè)備投入使用以來(lái)運(yùn)行狀況、包括交接、檢定、校準(zhǔn)、使用情況、故障、維修等所有信息。
6.3.4長(zhǎng)期不用的儀器設(shè)備每周開(kāi)機(jī)通電半小時(shí),以達(dá)到除濕的目的,或以其它方式定期維護(hù)保養(yǎng),使它們一直處于良好狀態(tài)。
7、化學(xué)危險(xiǎn)物品、易燃易爆劇毒物品管理制度
7.1本制度所稱化學(xué)危險(xiǎn)物品、易燃易爆劇毒物品,是指國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)gb/t12268-90《危險(xiǎn)貨物品名表》中所列的各種化學(xué)危險(xiǎn)性、易燃、易爆和劇毒的氣體、液體、固體。
7.2化學(xué)危險(xiǎn)物品、易燃易爆劇毒物品由專人管理,管理員要具備保密意識(shí),不得隨意將易燃易爆、劇毒物品、化學(xué)藥品的名稱、數(shù)量、性能告知他人。7.3化學(xué)危險(xiǎn)物品、易燃易爆劇毒物品必須單獨(dú)存放。
7.4各種盛裝有毒化學(xué)物品的容器,一律要有標(biāo)志明顯的“毒物”字樣,并使標(biāo)志向外。
7.5化學(xué)危險(xiǎn)物品、易燃易爆劇毒物品在入庫(kù)時(shí),管理人員必須檢查登記,并建立詳細(xì)帳冊(cè),包括總帳、明細(xì)帳、領(lǐng)用審批單、領(lǐng)用記錄冊(cè)。
7.6劇毒物品要專人專柜保管,準(zhǔn)確登記用量,使用時(shí)應(yīng)妥善保管,嚴(yán)格處理廢液,防止中毒事故。劇毒化學(xué)藥品庫(kù),應(yīng)備有專用的稱量工具。劇毒化學(xué)物品必須放于密閉的金屬或玻璃容器內(nèi),稱量工作須有人在旁監(jiān)護(hù),并應(yīng)在通風(fēng)櫥中
使用。如未用完,應(yīng)返回。
7.7使用場(chǎng)所應(yīng)保持清潔和通風(fēng)良好,工藝裝備應(yīng)盡量密封,工作時(shí)要穿戴好個(gè)人防護(hù)用具,如發(fā)現(xiàn)有故障時(shí),應(yīng)及時(shí)報(bào)告領(lǐng)導(dǎo)處理。
7.8劇毒物品,除按上述規(guī)定外,還有下列要求:使用人員應(yīng)熟知性質(zhì)并需經(jīng)過(guò)專門業(yè)務(wù)訓(xùn)練。實(shí)驗(yàn)裝備應(yīng)在通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行,工作前應(yīng)打開(kāi)通風(fēng)。應(yīng)配有消毒設(shè)施和急救設(shè)施。劇毒物品的使用工具、容器應(yīng)為專用,用完后消毒。皮膚有破損的人員,嚴(yán)禁操作劇毒物品。劇毒物品的溶糟應(yīng)有通風(fēng)裝置,非操作時(shí)間應(yīng)加蓋加鎖。經(jīng)過(guò)劇毒物品溶液處理過(guò)的工具,應(yīng)用清水沖洗,并放在通風(fēng)的地方。7.9化學(xué)危險(xiǎn)物品、易燃易爆劇毒物品自然失效,需要報(bào)廢,管理人員必須事先提出請(qǐng)示申請(qǐng)。經(jīng)主管部門審核、查驗(yàn)、確認(rèn)可以報(bào)廢時(shí),由主管領(lǐng)導(dǎo)簽字,做好帳冊(cè)登記,方可報(bào)廢。
7.10對(duì)不按規(guī)定使用、存放化學(xué)危險(xiǎn)物品、易燃易爆劇毒物品的,要視情節(jié)給予教育、處罰、限期整改,由此引發(fā)事故的,追究當(dāng)事人責(zé)任。對(duì)因工作不慎、管理不當(dāng),造成不良后果的管理人員,要追究其責(zé)任。
8、衛(wèi)生工作制度 8.1實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生管理按定人定區(qū)域劃分,實(shí)行片區(qū)負(fù)責(zé)制。
8.2實(shí)驗(yàn)室工作必須保持嚴(yán)肅、嚴(yán)密、嚴(yán)格、嚴(yán)謹(jǐn);室內(nèi)保持整潔有序,不準(zhǔn)喧嘩、打鬧、抽煙。
8.3嚴(yán)格衛(wèi)生責(zé)任制,各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有專人負(fù)責(zé)衛(wèi)生管理工作,室內(nèi)衛(wèi)生要定期打掃,保持實(shí)驗(yàn)室窗明臺(tái)凈、地面無(wú)可見(jiàn)污漬、儀器擺放整齊、實(shí)驗(yàn)臺(tái)面一塵不染。每日實(shí)驗(yàn)結(jié)束后清理廢物桶和水池管道,防止堵塞和腐蝕。實(shí)驗(yàn)完畢,應(yīng)立即進(jìn)行清潔整理,將使用儀器清洗干凈,玻璃儀器放入烘箱干燥,物歸原處,將
實(shí)驗(yàn)臺(tái),通風(fēng)櫥整理干凈。
8.4實(shí)驗(yàn)室工作人員上崗操作時(shí),應(yīng)按相關(guān)規(guī)定佩戴標(biāo)識(shí)、穿著實(shí)驗(yàn)服、帽。8.5實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生的“三廢”按相關(guān)規(guī)定妥善處理,劇毒廢棄物由實(shí)驗(yàn)室統(tǒng)一處理,不得私自傾倒。
8.6實(shí)驗(yàn)用過(guò)的儀器應(yīng)及時(shí)清潔干凈,放回指定位置,化學(xué)藥品歸藥品室,不得滯留現(xiàn)場(chǎng)。
8.7實(shí)驗(yàn)室、門口及走廊不準(zhǔn)堆放雜物,要求整潔通暢。保證實(shí)驗(yàn)室恒溫(20~25℃)、恒濕(相對(duì)濕度65~85%)無(wú)塵、無(wú)震動(dòng)、通風(fēng)良好。
9、本管理規(guī)定自至下發(fā)之日起執(zhí)行。
實(shí)驗(yàn)室工作準(zhǔn)則和規(guī)范篇四
實(shí)驗(yàn)室安全環(huán)保工作規(guī)范
實(shí)驗(yàn)室是企業(yè)進(jìn)行科技研發(fā)的重要基地,為搞好實(shí)驗(yàn)室安全環(huán)保工作,優(yōu)化科技園公共安全和環(huán)境,特制定本工作規(guī)范。
一 總 則
第一條:實(shí)驗(yàn)室安全環(huán)保和衛(wèi)生工作,關(guān)系到從業(yè)人員生命安全和財(cái)產(chǎn)免遭損失的重大問(wèn)題,各企業(yè)和全體實(shí)驗(yàn)室工作人員要樹(shù)立“預(yù)防為主,安全第一”的思想,堅(jiān)持“管研發(fā)必須同時(shí)管安全”、“誰(shuí)主管,誰(shuí)負(fù)責(zé)”的原則,一級(jí)抓一級(jí)、層層抓落實(shí)。在抓好技術(shù)研發(fā)的同時(shí),必須定期檢查,切實(shí)執(zhí)行各項(xiàng)安全環(huán)保管理制度。
第二條:實(shí)驗(yàn)室安全環(huán)保和衛(wèi)生工作,實(shí)行崗位責(zé)任制,分級(jí)負(fù)責(zé)管理。各企業(yè)應(yīng)加強(qiáng)對(duì)實(shí)驗(yàn)室安全環(huán)保和衛(wèi)生工作的領(lǐng)導(dǎo),明確責(zé)任人,并定期對(duì)所屬人員進(jìn)行安全環(huán)保和衛(wèi)生教育,完善安全生產(chǎn)“五本一卡”制度,建立“三級(jí)教育”卡片,依靠群眾,確保安全。
第三條:各實(shí)驗(yàn)室的安全環(huán)保和衛(wèi)生管理工作由實(shí)驗(yàn)室主任(無(wú)實(shí)驗(yàn)室主任的研發(fā)用房由課題組負(fù)責(zé)人)負(fù)責(zé),并設(shè)一名安全環(huán)保和衛(wèi)生督查員(兼職),協(xié)助實(shí)驗(yàn)室主任開(kāi)展安全環(huán)保和衛(wèi)生工作,組織或?qū)嵤⿲?shí)驗(yàn)室安全環(huán)保和衛(wèi)生教育,依據(jù)相關(guān)規(guī)定制定和完善實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部的安全環(huán)保和衛(wèi)生管理制度,督促進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的人員遵守安全環(huán)保和衛(wèi)生規(guī)定,檢查安全環(huán)保衛(wèi)生制度執(zhí)行情況,發(fā)現(xiàn)問(wèn)題及時(shí)整改,并對(duì)發(fā)生的安全、環(huán)保事故進(jìn)行調(diào)查處理及上報(bào)。第四條:安全環(huán)保和衛(wèi)生工作人人有責(zé)。實(shí)驗(yàn)室主任要負(fù)起健全實(shí)驗(yàn)室安全工作制度、加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室工作管理、定期檢查不安全因素的責(zé)任。實(shí)驗(yàn)室要嚴(yán)格用房負(fù)責(zé)人制度,做到每間用房均有用房負(fù)責(zé)人,并明確用房負(fù)責(zé)人職責(zé)。用房負(fù)責(zé)人職責(zé):負(fù)責(zé)本室的水、電、煤氣、蒸汽、門、窗等設(shè)施的每日檢查,發(fā)現(xiàn)問(wèn)題及時(shí)報(bào)修。落實(shí)衛(wèi)生值日,做好室內(nèi)環(huán)保安全及設(shè)備物資保管和室內(nèi)一般儀器設(shè)備的日常檢查維護(hù),發(fā)現(xiàn)隱患,及時(shí)整改。負(fù)責(zé)落實(shí)本室危險(xiǎn)作業(yè)、危險(xiǎn)設(shè)備安全操作規(guī)程和易燃、易爆、有毒、有害化學(xué)物品的安全管理,以及廢棄物(藥)品的安全處臵。負(fù)責(zé)對(duì)室內(nèi)其他成員管理工作,檢查督促實(shí)驗(yàn)室各項(xiàng)制度落實(shí)及本實(shí)驗(yàn)室周圍環(huán)境管理。防止各種事故發(fā)生。
第五條:新進(jìn)員工進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室之前,必須組織進(jìn)行安全意識(shí)和安全知識(shí)的“三級(jí)”安全教育,同時(shí)建立安全教育卡片檔案。凡未經(jīng)過(guò)“三級(jí)”安全教育的員工不準(zhǔn)進(jìn)實(shí)驗(yàn)室,經(jīng)過(guò)安全教育,考核不合格的員工不得單獨(dú)進(jìn)實(shí)驗(yàn)室做實(shí)驗(yàn)。
任何人不得在實(shí)驗(yàn)室嬉鬧、不得在儀器室、貯藏室和實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所吸煙,不得在實(shí)驗(yàn)室燒飯菜和喝(酗)酒、聚餐。
第六條:在使用新工藝、新技術(shù)、新設(shè)備,都應(yīng)制定相應(yīng)的安全制度、操作規(guī)程、應(yīng)急措施和防止污染環(huán)境等措施,對(duì)操作人員進(jìn)行訓(xùn)練和安全技術(shù)教育后,才能進(jìn)行工作。
第七條:實(shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)生異常情況時(shí),不會(huì)導(dǎo)致人身傷害和火災(zāi)、爆炸等危險(xiǎn)事故的,屬于一般實(shí)驗(yàn),所使用的設(shè)備、藥品由實(shí)驗(yàn)人員按照日檢查制度,每天檢查確認(rèn)安全和正確無(wú)誤后即可進(jìn)行實(shí)驗(yàn) ;實(shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)生異常時(shí)可能會(huì)發(fā)生火災(zāi)、爆炸或人身傷害等危險(xiǎn)事故的,屬于危險(xiǎn)性實(shí)驗(yàn),所使用的設(shè)備、藥品及其實(shí)驗(yàn)程序等必須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室主任檢查,確認(rèn)安全和正確無(wú)誤并告知實(shí)驗(yàn)人員后方可進(jìn)行實(shí)驗(yàn);在禁止煙火的實(shí)驗(yàn)室里進(jìn)行易燃易爆類實(shí)驗(yàn)屬于特別危險(xiǎn)的實(shí)驗(yàn),必須在實(shí)驗(yàn)前向園區(qū)管理人提出書面申請(qǐng),經(jīng)園區(qū)批準(zhǔn)并采取可靠的防范措施后方可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
二 安全使用水、電、煤氣,做好防火管理
第八條:實(shí)驗(yàn)室未經(jīng)園區(qū)批準(zhǔn),不得擅自安裝使用火爐、煤氣爐、開(kāi)式電爐、電取暖器和大功率的電加熱器,不得亂拉亂接電線。普通實(shí)驗(yàn)樓內(nèi)禁止做高壓實(shí)驗(yàn)。
第九條:各類實(shí)驗(yàn)室的結(jié)構(gòu)和設(shè)施必須符合有關(guān)規(guī)定,實(shí)驗(yàn)室需要安裝水、電、煤氣管道龍頭時(shí),應(yīng)報(bào)園區(qū)審核同意后,由專門技術(shù)操作人員實(shí)施,持證上崗。安裝煤氣管道必須由煤氣公司操作。電線鋪設(shè)和電器設(shè)備安裝必須符合《低規(guī)》和實(shí)驗(yàn)室安全管理的有關(guān)要求,由電工規(guī)范施工。禁火場(chǎng)所動(dòng)用明火,需報(bào)消防部門批準(zhǔn),待采取有效的防范措施后,方可進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)室裝修或改變用途的必須符合消防安全要求,并提前一周向園區(qū)申報(bào)消防審核,經(jīng)批準(zhǔn)后方可進(jìn)行裝修。
第十條:電焊工、氣焊工、電工等特殊工種,應(yīng)經(jīng)過(guò)專門培訓(xùn),取得《上海市特種作業(yè)安全操作證》才能獨(dú)立上崗操作。第十一條:由于目前電壓、水壓不夠穩(wěn)定,部分電氣設(shè)備性能不夠完善,原則上除使用電冰箱外,其他儀器設(shè)備在通電或通水時(shí),必需有人值班。人一旦離開(kāi)則應(yīng)及時(shí)切斷電源和水源。
第十二條:加強(qiáng)冰箱管理,確保使用安全。非防爆電冰箱內(nèi)禁止存放易燃、易爆、低沸點(diǎn)、強(qiáng)腐蝕等藥品。所有冰箱禁止存放性質(zhì)相互抵觸的化學(xué)藥品和私人物品。
第十三條:實(shí)驗(yàn)室每天下班后要進(jìn)行安全檢查,拉閘斷電、關(guān)閉水源、關(guān)窗鎖門,機(jī)電設(shè)備夜間運(yùn)轉(zhuǎn)應(yīng)留專人值班管理。
三 加強(qiáng)化學(xué)危險(xiǎn)品管理
第十四條:各單位使用化學(xué)危險(xiǎn)品時(shí),應(yīng)根據(jù)使用情況購(gòu)買最少數(shù)量。實(shí)驗(yàn)室領(lǐng)用化學(xué)危險(xiǎn)品必須指定專人保管,存放地點(diǎn)必須符合安全要求。并應(yīng)配備適用的消防器材和防護(hù)用品。在可能發(fā)生化學(xué)灼傷的地方應(yīng)設(shè)有常備水源和必要的中和劑。
第十五條:使用(儲(chǔ)存)化學(xué)品應(yīng)有標(biāo)識(shí)和安全標(biāo)簽,操作人員應(yīng)掌握相應(yīng)安全技術(shù)知識(shí)。對(duì)儲(chǔ)存的化學(xué)危險(xiǎn)品應(yīng)定期檢查。安全標(biāo)簽若脫落或損壞,經(jīng)檢查確認(rèn)后應(yīng)及時(shí)補(bǔ)貼,確保安全。性質(zhì)相互抵觸或滅火方法不同的藥品,不可共同存放。對(duì)所保管的化學(xué)危險(xiǎn)品,應(yīng)定期核對(duì)帳物,必須做到帳物相符,禁止物品流失。
第十六條:根據(jù)消防有關(guān)規(guī)定,實(shí)驗(yàn)室內(nèi)做實(shí)驗(yàn)剩余的化學(xué)危險(xiǎn)品總量不得超過(guò)5kg,藥品貯藏室每柜的總儲(chǔ)量不得超過(guò)100kg。在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)嚴(yán)禁堆放超量易燃、易爆等化學(xué)危險(xiǎn)品,更不能存放與實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的易燃、易爆的危險(xiǎn)品。必須嚴(yán)格禁止實(shí)驗(yàn)室內(nèi)既是實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所,又是危險(xiǎn)品儲(chǔ)藏室的現(xiàn)象。化學(xué)品需要轉(zhuǎn)移或分裝到其他容器應(yīng)標(biāo)明其內(nèi)容。
第十七條:實(shí)驗(yàn)室存放易燃、易爆氣體鋼瓶不準(zhǔn)與明火同室,和電源插座、開(kāi)關(guān)也必須要保持至少大于2米以上的距離,門口應(yīng)有醒目禁火標(biāo)志。使用有毒的氣體鋼瓶應(yīng)備有專用防毒面具,放臵明處,并制定防泄漏的應(yīng)急措施。氣體鋼瓶停用時(shí)要關(guān)好氣閥。
第十八條:實(shí)驗(yàn)室應(yīng)備有必要的防火滅火專用器材。除此以外,凡使用易燃、易爆物品的實(shí)驗(yàn)室還必須備有石棉布,放于明處。經(jīng)常對(duì)有關(guān)人員進(jìn)行工作安全使用化學(xué)品的教育和培訓(xùn),掌握必要的應(yīng)急處理方法和自救措施。
第十九條:對(duì)劇毒、易爆危險(xiǎn)藥品的管理與使用,必須嚴(yán)格執(zhí)行國(guó)務(wù)院2002年第344號(hào)令《危險(xiǎn)化學(xué)品安全管理?xiàng)l例》及《華東理工大學(xué)化學(xué)危險(xiǎn)品管理辦法》等規(guī)定。
第二十條:購(gòu)買劇毒、易爆危險(xiǎn)藥品必須是本單位在冊(cè)人員,必須經(jīng)負(fù)責(zé)人簽字,報(bào)園區(qū)審核同意后,雙人購(gòu)買,雙人對(duì)該藥品的安全負(fù)有同等責(zé)任,如不按上述規(guī)定,園區(qū)有權(quán)拒絕藥品進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。
第二十一條:劇毒、易爆危險(xiǎn)藥品必須雙人使用,用多少,領(lǐng)多少,并做好應(yīng)急預(yù)案和詳細(xì)使用記錄。一般情況下,實(shí)驗(yàn)室不得存放劇毒、易爆化學(xué)品。如有特殊情況要將該藥品保存在實(shí)驗(yàn)室,必須具備安全儲(chǔ)存條件,并實(shí)行雙人、雙鎖暫時(shí)保管。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,若還有余量,必須進(jìn)行無(wú)害化處理。第二十二條:嚴(yán)格執(zhí)行劇毒、易爆危險(xiǎn)藥品的管理制度。嚴(yán)禁把劇毒、易爆危險(xiǎn)藥品帶出實(shí)驗(yàn)室。
四 加強(qiáng)貴重物品的管理
第二十三條:對(duì)稀有金屬、貴重物品、儀器設(shè)備要登記注冊(cè),落實(shí)安全防盜措施,在使用過(guò)程中要堅(jiān)持收、發(fā)、領(lǐng)、退制度。
第二十四條:領(lǐng)用貴重金屬材料必須由兩人同時(shí)領(lǐng)用,用后廢渣、廢料要按規(guī)定妥善回收處理。
第二十五條:對(duì)機(jī)密文件、圖紙、重要科研資料,要確定專人負(fù)責(zé),嚴(yán)格登記、保密、傳遞使用手續(xù)。
五 加強(qiáng)壓力容器的安全管理
第二十六條:壓力容器必須按規(guī)定進(jìn)行定期檢測(cè),凡未經(jīng)安全檢測(cè),未取得安全合格證的(含新購(gòu)臵的壓力容器)不能投入使用。壓力容器的使用單位,應(yīng)在操作過(guò)程中明確操作要求,建立壓力容器管理與操作責(zé)任制。制定應(yīng)急救援預(yù)案,定期演練,并加強(qiáng)日常維護(hù)和保養(yǎng)。
第二十七條:壓力容器的操作必須嚴(yán)格按使用說(shuō)明書進(jìn)行,不得違規(guī)操作。
第二十八條:若壓力容器的主要受壓元件發(fā)生裂縫、變形、泄漏等危及安全現(xiàn)象時(shí),應(yīng)馬上停止操作并及時(shí)采取應(yīng)急措施。第二十九條:各種氣體鋼瓶要輕裝輕卸。氧氣瓶禁油。有毒、有害、易燃、易爆氣體鋼瓶要關(guān)緊閥門,防止泄漏。
第三十條:實(shí)驗(yàn)室各種氣體鋼瓶的放臵應(yīng)嚴(yán)格按照規(guī)定,設(shè)有固定裝臵。鋼瓶周圍嚴(yán)禁明火與產(chǎn)生電火花的電氣。不準(zhǔn)使用各類加熱器。
第三十一條:各實(shí)驗(yàn)室必須指定專人負(fù)責(zé)各類鋼瓶的申領(lǐng)和使用。專人保管,專人使用。定室定點(diǎn)使用的各類易燃、易爆、有毒氣體鋼瓶,不準(zhǔn)擅自更改存放地點(diǎn)。
第三十二條:因?qū)嶒?yàn)需要使用易燃、易爆、有毒氣體鋼瓶的同一現(xiàn)場(chǎng),同種氣體鋼瓶不得超過(guò)兩瓶。
六 儀器、設(shè)備安全管理
第三十三條:實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備應(yīng)按技術(shù)要求合理調(diào)試和使用。嚴(yán)格按有關(guān)技術(shù)資料(或使用說(shuō)明書)維護(hù)保養(yǎng),確保正常運(yùn)行。
第三十四條:實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的儀器設(shè)備應(yīng)備原配插頭、插座。安裝調(diào)試時(shí)應(yīng)檢查其規(guī)格、質(zhì)量及連接情況,如不符合要求應(yīng)及時(shí)更換或改正。
第三十五條:儀器設(shè)備在安裝完畢擬通電之前,需兩人以上再次嚴(yán)格對(duì)照說(shuō)明書,確認(rèn)無(wú)誤才能通電,并做好記錄以備檢查。
第三十六條:大型貴重儀器及特種危險(xiǎn)設(shè)備必須有專人負(fù)責(zé)。專管人員(維修人員)應(yīng)具有一定的技術(shù)水平,并保持相對(duì)穩(wěn)定,專管人員要建立與完善儀器設(shè)備安全操作制度,并承擔(dān)相應(yīng)的安全職責(zé)。
第三十七條:實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的烘箱、冰箱、電爐應(yīng)作科研之用,不能挪作他用。烘箱、電爐要嚴(yán)格按其說(shuō)明書及制度使用操作,且在使用過(guò)程中不準(zhǔn)離開(kāi)場(chǎng)所。
第三十八條:烘箱、冰箱、電爐等電器設(shè)備周圍不得堆放化學(xué)危險(xiǎn)品,特別是易燃、易爆、有腐蝕性、易揮發(fā)的化學(xué)試劑。應(yīng)保持通道暢通,一旦發(fā)生事故立即切斷電源,并采取相應(yīng)措施,抑制事故擴(kuò)散并及時(shí)向園區(qū)及有關(guān)部門報(bào)告。
第三十九條:非防爆烘箱、冰箱內(nèi)不得放臵易燃、易爆化學(xué)危險(xiǎn)品。
第四十條:實(shí)驗(yàn)室不準(zhǔn)使用“熱得快”,不準(zhǔn)將電爐用于私人生活。因?qū)嶒?yàn)需要必須使用開(kāi)式電爐的,需經(jīng)企業(yè)提出申請(qǐng)、園區(qū)批準(zhǔn)并備案。
第四十一條:準(zhǔn)用的各類電爐尤其是開(kāi)式電爐,必須專人負(fù)責(zé),定點(diǎn)使用,并妥善保管。
第四十二條:使用電爐過(guò)程中周圍不準(zhǔn)放易燃物,不準(zhǔn)用電爐烘烤衣物,或?qū)⒁挛锱c其他可燃物掛在電爐上方,使用電爐不準(zhǔn)在電爐下面墊木板,也不要將電爐放在木箱、紙箱盒內(nèi)。用完后也應(yīng)立即拔下插頭,待其溫度下降后才能再存放起來(lái)。若遇停電,務(wù)必及時(shí)拔去電爐插頭。
第四十三條:電爐應(yīng)有專用插座,不應(yīng)與其他電器共用一個(gè)插座,電爐電線應(yīng)符合用電標(biāo)準(zhǔn),要選擇截面大小得當(dāng),絕緣良好的導(dǎo)線,防止絕緣導(dǎo)線芯裸露和插頭破損。
七 實(shí)驗(yàn)室環(huán)保管理
第四十四條:各企業(yè)要重視實(shí)驗(yàn)室的環(huán)保工作。定期研究和檢查因高溫、低溫、輻射、病菌、噪聲、毒性、激光、粉塵、超凈等可能對(duì)人體有害的情況并采取必要措施。危險(xiǎn)化學(xué)品工作場(chǎng)所應(yīng)設(shè)有急救措施,并提供應(yīng)急處理的方法。強(qiáng)化實(shí)驗(yàn)室的工作環(huán)境和勞動(dòng)保護(hù)。
第四十五條:實(shí)驗(yàn)室主任要親自抓好環(huán)境管理和勞動(dòng)保護(hù),健全管理制度和“三廢”處理規(guī)程。堅(jiān)持對(duì)新來(lái)實(shí)驗(yàn)室工作人員實(shí)行“先教育后實(shí)驗(yàn)”制度。必要時(shí)可設(shè)一名兼職環(huán)保工作員,協(xié)助實(shí)驗(yàn)室主任抓好環(huán)保工作,做好“三廢”處理。
第四十六條:實(shí)驗(yàn)室應(yīng)盡量避免選擇“三廢”污染嚴(yán)重的實(shí)驗(yàn)。在確立科研項(xiàng)目的同時(shí),應(yīng)提出有效的“三廢”治理方法;對(duì)沒(méi)有妥善處理“三廢”的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)予停開(kāi),或另選流程。消除、減少和控制工作場(chǎng)所危險(xiǎn)化學(xué)品產(chǎn)生的危害應(yīng)通過(guò)下列方法:
⑴ 選用無(wú)毒或低毒的化學(xué)替代品。
⑵ 選用可將危害消除或減少到最低程度的技術(shù)。
⑶ 采用能消除或降低危害的工程控制措施(如隔離、密閉等)。第四十七條:實(shí)驗(yàn)室要嚴(yán)格遵守國(guó)家環(huán)境保護(hù)工作的有關(guān)規(guī)定,不隨意排放廢氣、廢液、廢物,不得污染環(huán)境。
第四十八條:根據(jù)“誰(shuí)污染、誰(shuí)治理”原則,實(shí)驗(yàn)室對(duì)少量酸堿廢液,應(yīng)加以中和,符合廢液排放要求后排放。對(duì)其它無(wú)機(jī)廢液應(yīng)作預(yù)處理,使有害物質(zhì)沉淀,廢液符合排放要求后排放。對(duì)含銀、含鉻或其它含貴金屬、重金屬的廢液,應(yīng)分別儲(chǔ)存,盡量回收利用。
第四十九條:實(shí)驗(yàn)室對(duì)有機(jī)溶劑等廢液,應(yīng)分別收集并交由簽約的廢液收集機(jī)構(gòu),集中處理的廢液桶(瓶)必須加蓋,并將填好的廢液收集單其中一聯(lián)貼在容器上。對(duì)少數(shù)不能按要求歸大類儲(chǔ)存的廢液、試劑瓶,必須裝入木箱、柳條箱,每瓶貼好聯(lián)單,征得收集機(jī)構(gòu)同意后方可接受處理。對(duì)需處理的化學(xué)試劑空瓶也必須裝入木箱、柳條箱。對(duì)遇潮、遇水容易起化學(xué)反應(yīng)及性質(zhì)不穩(wěn)定、易分解變質(zhì)的化學(xué)藥品和一級(jí)易燃化學(xué)品應(yīng)事先登記預(yù)約,集中處理。
第五十條:實(shí)驗(yàn)過(guò)程中如遇產(chǎn)生有害氣體,應(yīng)盡力在通風(fēng)櫥內(nèi)或通風(fēng)罩下進(jìn)行,如有害氣體的氣量較大時(shí),應(yīng)采取措施,加以吸收。
第五十一條:對(duì)散發(fā)有害氣體或粉塵的實(shí)驗(yàn)設(shè)備,應(yīng)盡可能安裝通風(fēng)、吸塵等措施。
第五十二條:實(shí)驗(yàn)室在使用產(chǎn)生噪聲設(shè)備時(shí),必須采取消音、隔離措施,使噪音降低到規(guī)定以下。
第五十三條:實(shí)驗(yàn)室廢水分成兩部分管理:對(duì)低濃度的經(jīng)無(wú)害化處理的廢水可由下水道進(jìn)入污水處理站;對(duì)高濃度易燃有害的廢液須采取分類集中外送處理。
八 保持實(shí)驗(yàn)室場(chǎng)所的整潔
第五十四條:實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立天天有衛(wèi)生值日或?qū)H舜驋咧贫,做到每天一小掃,每周一大掃,每月徹底掃。保持?shí)驗(yàn)室窗明幾凈,無(wú)垃圾、無(wú)痰跡、無(wú)蛛網(wǎng)、無(wú)積灰、無(wú)蟑螂、無(wú)雜物,實(shí)驗(yàn)臺(tái)、凳、櫥、柜、儀器、設(shè)備、瓶子放臵整齊、清潔。
第五十五條:實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不準(zhǔn)存放私人物品。實(shí)驗(yàn)大樓公共場(chǎng)所不準(zhǔn)亂堆放廢液、空瓶罐等物品。
第五十六條:文明使用公共廁所。嚴(yán)禁將碎玻璃、骨頭、茶葉渣、塑料紙等易堵雜物倒入馬桶或小便槽中。
九 加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室搬遷、調(diào)整過(guò)程中的安全環(huán)保管理 第五十七條:各企業(yè)實(shí)驗(yàn)室在搬遷、調(diào)整過(guò)程中,必須遵從“誰(shuí)主管,誰(shuí)負(fù)責(zé)”的原則,強(qiáng)化主體責(zé)任,保證安全、文明搬遷和人員文明離園。杜絕各類安全隱患,保持良好的環(huán)境衛(wèi)生。
第五十八條:搬遷、調(diào)整過(guò)程中涉及鋼瓶、壓力容器等特種設(shè)備,必須歸屬明確、責(zé)任到人。
第五十九條:搬遷、調(diào)整過(guò)程中涉及化學(xué)品,尤其危險(xiǎn)化學(xué)品除注意安全遷移外,不得隨意丟棄、遺留。處臵廢棄化學(xué)品必須按照“誰(shuí)使用,誰(shuí)管理”、“誰(shuí)污染,誰(shuí)治理”的原則,對(duì)廢棄化學(xué)品亂丟、亂倒或遺留不管者,將嚴(yán)肅處理。
第六十條:搬遷、調(diào)整過(guò)程中難以及時(shí)處臵的廢棄化學(xué)品,應(yīng)送市內(nèi)有專業(yè)處理資質(zhì)的單位處理,但費(fèi)用自理。
十一 實(shí)行獎(jiǎng)懲,賞罰分明 第六十一條:實(shí)驗(yàn)室如發(fā)生安全事故,應(yīng)積極采取措施及時(shí)處理,減少損失,并按規(guī)定立即上報(bào),不許隱瞞或拖延不報(bào),重大事故應(yīng)保護(hù)好現(xiàn)場(chǎng)。
第六十二條:對(duì)認(rèn)真執(zhí)行本規(guī)范,遵章守法、措施落實(shí)、無(wú)事故、無(wú)違章、環(huán)境整潔的實(shí)驗(yàn)室,各企業(yè)應(yīng)給予表?yè)P(yáng)和獎(jiǎng)勵(lì),事跡突出,成績(jī)顯著的園區(qū)定期予以表彰。
第六十三條:對(duì)違反本規(guī)范者,要給予批評(píng)教育,限期整改。對(duì)玩忽職守,嚴(yán)重違反本規(guī)范及有關(guān)規(guī)定、造成事故、發(fā)生人員受傷和經(jīng)濟(jì)損失的,園區(qū)將根據(jù)情節(jié)輕重、損失大小,提請(qǐng)有關(guān)部門分別給予批評(píng)、經(jīng)濟(jì)處罰或行政處分,直至依法追究刑事責(zé)任。
華東理工科技園 二〇一四年一月一日
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