蛋白質(zhì)等電點的名詞解釋 蛋白質(zhì)的等電點名詞解釋生物化學
在等電點時,蛋白質(zhì)分子以兩性離子形式存在,其分子凈電荷為零(即正負電荷相等),此時蛋白質(zhì)分子顆粒在溶液中因沒有相同電荷的相互排斥,分子相互之間的作用力減弱,其顆粒極易碰撞、凝聚而產(chǎn)生沉淀,所以蛋白質(zhì)在等電點時,其溶解度最小,最易形成沉淀物。
蛋白質(zhì)等電點的測定方法:
方法:平板等電聚焦
原理:蛋白質(zhì)分子在含有載體兩性電介質(zhì)形成的連續(xù)而穩(wěn)定的線性pH梯度中進行電泳。但不自是按照等電點不同被分離。
儀器:Bio-Rad Model 111Mini IEF Cell
樣品要求:
液體:濃度>3mg/ml;體積>200ul;固體:質(zhì)量>200ug
樣品純度>90%;含鹽量<3 0mM;分子量:一般要求大于1000Da
常見影響測試情況:
1、蛋白質(zhì)純度不足
2、含鹽量過高
3、蛋白質(zhì)分子量太小,導致無法固定染色
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